SDS PAGE y electroforesis en gel
SDS PAGE vs electroforesis en gel
La electroforesis se puede utilizar para determinar la masa de un objeto generalmente para proteínas y ácido desoxirribonucleico (ADN). La hebra de ADN, cuando se introduce en los productos químicos, puede acelerar o ralentizar el proceso de información. Se utilizan marcadores de ADN de masa conocida para aproximar el tamaño de los objetos que viajan una vez que la electroforesis ha terminado. La electroforesis es la herramienta más utilizada para los biólogos moleculares y los bioquímicos.
Hay dos tipos de electroforesis que se usan comúnmente en este proceso. Estos son electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) y electroforesis en gel nativo.
SDS-PAGE es un método no selectivo de electroforesis en gel utilizado en campos como: bioquímica, medicina forense, biología y genética para separar las proteínas de su movilidad electroforética. SDS es un surfactante aniónico que se puede usar para ayudar a lisar las células durante la extracción de ADN y para separar proteínas en SDS-PAGE. Durante la electroforesis, una mezcla de proteínas se licua primero en una solución de SDS. Luego, se aplica una sustancia llamada mercaptoetanol para eliminar los enlaces disulfuro y hacer que la proteína sea lineal. Entonces se inicia la electroforesis. Los resultados producirían dos residuos de moléculas, uno de los cuales es SDS-PAGE.
La ausencia de SDS-PAGE no es un problema ya que la electroforesis en gel todavía se puede hacer solo porque las proteínas no pierden toda su estructura secundaria y terciaria y no se abren en barras generalmente rectas.
Mientras tanto, la electroforesis en gel nativa utiliza el gel como medio anticonvectivo. Generalmente se usa para la separación de macromoléculas biológicas como el ADN, el ácido ribonucleico (ARN) y la proteína. También se puede utilizar para la separación de nanopartículas.
Hay dos geles principales utilizados en la electroforesis de gel nativo, a saber:
Gel de agarosa que se utiliza para moléculas más grandes. Este gel no identifica pequeñas diferencias entre dos bandas moleculares. También se utiliza únicamente para la separación de ADN. La visualización del gel de agarosa se realiza con la mezcla de bromuro de etidio.
Gel de poliacrilamida que se utiliza para moléculas más pequeñas. Este gel identifica las diferencias entre bandas moleculares. Aparte del ADN, también puede separar proteínas.
Resumen:
1.SDS-PAGE es un método no selectivo de electroforesis en gel utilizado en campos tales como: bioquímica, medicina forense, biología y genética para separar las proteínas de su movilidad electroforética mientras que la electroforesis en gel se usa generalmente para la separación de macromoléculas biológicas como el ADN ácido ribonucleico (ARN), y proteína. También se puede utilizar para la separación de nanopartículas.
2. La electroforesis en gel nativo tiene dos tipos, a saber: gel de agarosa y gel de poliacrilamida.
